关于从重测序数据中提取基因序列

我目前有重测序数据,然后从数据下载了基因序列,请问如何从重测序数据中提取出该基因的序列!

您好,从重测序数据中提取特定基因序列的一般步骤如下:

  1. 对重测序数据进行质量控制,去除低质量 Reads。可以使用 Trimmomatic、FastQC 等工具。
  2. 对过滤后的 Reads 进行拼接,生成更长的 Contigs。可以使用 Trinity、SOAPdenovo 等拼接软件。
  3. 使用 BLAST 或 Bowtie2 将 Contigs 比对到参考基因组或已知基因序列,查找目标基因所在的 Contig。
  4. 使用提取工具如 Seqtk 从相应的 Contig 中取出目标基因序列。
    具体操作步骤:
  5. 质控Reads数据
    trimmomatic PE -phred33 input_forward.fq input_reverse.fq output_forward_paired.fq output_forward_unpaired.fq output_reverse_paired.fq output_reverse_unpaired.fq ILLUMINACLIP:TruSeq3-PE.fa:2:30:10 LEADING:3 TRAILING:3 SLIDINGWINDOW:4:15 MINLEN:36
  6. 拼接Contigs
    Trinity --seqType fq --left output_forward_paired.fq --right output_reverse_paired.fq --CPU 10 --max_memory 100G --output trinity_denovo
  7. BLAST比对查找目标基因
    blastn -query trinity_denovo.fasta -subject target_gene.fasta -outfmt 6 -out trinity_denovo_vs_targetgene.txt
  8. 提取目标基因序列
    seqtk subseq trinity_denovo.fasta Contig123:1000-2000 > target_gene.fasta
    上述仅作示例说明,实际操作时请根据实际情况调整参数和工具。