qPCR的绝对定量实验怎么做啊

本人有一个菌株，要给它设计一条特异性引物，用qPCR定量分析，但网上都是qPCR的相对定量的实验方案，想问问有没有人做过绝对定量，怎么设计实验方案，qPCR程序如何设定，如何分析实验结果。